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2016
7.18

紫外分光光度法測定蛋白質含量

紫外分光光度法測定蛋白質含量一、實驗原理由于蛋白質分子中酪氨酸和色氨酸殘基的苯環含有共軛雙鍵，因此蛋白質具有吸收紫外線的性質，吸收高峰在280nm波長處。在此波長范圍內，蛋白質溶液的光吸收值（OD280）與其含量呈正比關系，可用作定量測定。利用紫外吸收法測定蛋白質含量的優點是民迅速、簡便、不消耗樣品，低濃度鹽類不干擾測定。因此，在蛋白質和酶的生化制備中（特別是在柱層析分離中）得到廣泛應用。此法的缺點是：（1）對于測定那些與標準蛋白質酪氨酸和色氨酸含量差異較大的蛋白質，有一定的...
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2016
7.18

考馬斯亮藍染色測定蛋白質含量

考馬斯亮藍染色測定蛋白質含量一、實驗原理考馬斯亮藍（CoomassieBrilliantBlue）測定蛋白含量存在著兩種不同顏色形式，紅色和藍色。此染料與蛋白質結合后顏色由紅色形式轉變藍色形式，zui大光吸收由465nm變成595nm。在一定蛋白質濃度范圍內，蛋白質和染料結合符合比爾定律（Beer’slaw），因此可以通過測定染料在595nm處吸收的增加量得到與其結合的蛋白質量。本法測定范圍為10~100µg蛋白質。由于該法簡單、迅速、干擾物質少、重復性好、靈敏度...
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2016
7.14

堿性磷酸酶的分離提取及比活力的測定

堿性磷酸酶的分離提取及比活力的測定一、實驗原理堿性磷酸酶（alkalinephosphataseEC3.1.3.1簡稱為ALPase）廣泛存于微生物界和動物界。ALPase能催化幾乎所有的磷酸單酯的水解反應，產生無機磷酸和相應的醇、酚或糖。它也可以催化磷酸基團的轉移反應，磷酸基團從磷酸酯轉移到醇、酚或糖等磷酸受體上。在磷的生物和化學循環過程中，ALPase起了及其重要的作用。在生物體內ALPase與磷的代謝直接相關，參與磷與鈣物質的消化、吸收、分泌以及骨骼的形成等生理生化過程...
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2016
7.14

酶的定義、特性及堿性磷酸酶于人體的意義

酶的定義、特性及堿性磷酸酶于人體的意義一、酶的定義：酶（enzyme）是具有催化特定化學反應的蛋白質、RNA或其復合體.是生物催化劑,能通過降低反應的活化能加快反應速度,但不改變反應的平衡點.絕大多數酶的化學本質是蛋白質.二、酶的特性：1.性：酶的催化效率比無機催化劑更高,使得反應速率更快；2.專一性：一種酶只能催化一種或一類底物,如蛋白酶只能催化蛋白質水解成多肽；3.多樣性：酶的種類很多,大約有4000多種；4.溫和性：是指酶所催化的化學反應一般是在較溫和的條件下進行的；5...
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2016
7.13

Folin-酚試劑法（Lowry法）測定蛋白質含量

Folin-酚試劑法（Lowry法）測定蛋白質含量一、實驗原理蛋白質含有兩個以上的肽鍵（—CO—NH）,因此有雙縮脲反應，在堿性溶液中，能與CU2+形成絡合物。Folin-酚試劑反應是在雙縮脲反應的基礎上，引進Folin試劑（磷鉬酸-鎢酸試劑）,蛋白質-銅絡合物能還原磷鉬酸-磷鎢酸試劑，生成藍色物質。在一定條件下，藍色強度與蛋白質的量成正比例。本法的優點是操作簡便、靈敏度高、較此外吸收法靈敏10~20倍，較雙縮脲法靈敏100倍，反應約在15min內有zui大顯色，并至少可穩定...
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2016
7.13

Hanus法測定不飽和脂肪酸的碘價

Hanus法測定不飽和脂肪酸的碘價一、實驗原理在適當條件下，不飽和脂肪酸的不飽和鍵能與碘、溴或氯起加成反應。脂肪分子中如含有不飽和脂酰基，即能吸收碘。100g脂肪所吸收碘的克數稱為碘價。碘價的高低表示脂肪不飽和程度的大小。由于碘與脂肪的加成作用很慢，故于Hanus試劑中加入適量溴，使產生溴化碘，再與脂肪作用。過量的溴化碘與脂肪作用后，測定溴化碘剩余量即可求得脂肪之碘價，本法的反應如下：二、實驗用品（一）器材（1）碘價滴定瓶（250~300ml），或用具塞錐形瓶代替。（2）量筒...
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2016
7.11

蔬菜中膳食纖維的藥學價值和危害

蔬菜中膳食纖維的藥學價值和危害定儀：膳食纖維是指不能被人體消化道酵素分解的多糖類及木植素。英國國家顧問委員會建議膳食纖維攝入量為人均25-30g/天；美國FDA推薦的總膳食纖維攝入量為人均每日20-35g（成人）；澳大利亞有關機構指出，人均每日攝入膳食纖維25g，可明顯減少冠心病的發病率和死亡率。中國營養學會2000年提出：我國成年人膳食纖維的適宜攝入量為每天30g左右。但據測算，我國人均每日的實際攝入量僅為14克左右，攝入量嚴重不足，且攝入量隨食品精加工水平的提高呈逐步下降...
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2016
7.7

微量凱氏定氮法測定蛋白質總含量

微量凱氏定氮法測定蛋白質總含量一、實驗原理天然有機物（如蛋白質和氨基酸等化合物）的總氮量通常用微量凱氏定氮法（micro-kjeldahlmethod）來測定。當被測的天然含氮化合物與濃硫酸共熱時分解出氨，氨與硫酸反應生成硫酸銨，此過程稱為消化。由于消化過程進行緩慢，實驗中常添加硫酸鉀和硫酸銅的混合物來促進，硫酸銅是催化劑，硫酸鉀可提高消化液的沸點。氧化劑過氧化氫也能加速反應。消化完成后，在凱氏定氮儀中加入強堿堿化消化液，使碳酸銨分解出氨。用水蒸汽蒸餾法將氨蒸入無機酸溶液中，...
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